熒光檢測器(Fluorescence Detector,簡稱FLD)是高壓液相色譜儀常用的一種檢測器。用紫外線照射色譜餾分,當試樣組分具有熒光性能時,即可檢出。
熒光檢測器優點
①靈敏度極高。熒光檢測器的靈敏度比紫外-可見光檢測器的靈敏度約高兩個數量級,最小檢測量可達10^(-13g)。這是因為在紫外吸收檢測法中,被檢測的信號A=lg(Io/I),即當樣品濃度很低時,檢測器所檢測的是兩個較大信號Io及I的微小差別;而在熒光檢測法中,被檢測的是疊加在很小背景上的熒光強度。熒光檢測器是最靈敏的液相色譜檢測器,特別適合于痕量分析。愈是常用的衡量檢測器靈敏度的基準物質。另外,熒光檢測器的靈敏度還可以用水的拉曼譜帶的信噪比來衡量。
②良好的選擇性。產生熒光的一個必要條件是該物質的分子具有能吸收激發光能量的吸收帶,即物質分子具有一定的吸收結構;另外的條件是吸收了激發光能量之后的分子具有高的熒光效率。相對較少的分子具有大的足夠檢測的量子效率是熒光檢測器高選擇性的主要原因。在很多情況下,熒光檢測器的高選擇性能夠避免不發熒光的成分的干擾,成為熒光檢測的獨特優點。
③線性范圍較寬。雖然比紫外吸收檢測器窄,但對大多數痕量分析,該線性范圍已足夠寬。在分析物質濃度較大時,發射強度由于內濾效應可能隨濃度增加而降低。
④受外界條件的影響較小。
⑤只要選作流動相的溶劑不會發射熒光,熒光檢測器就能適用于梯度洗脫。
熒光檢測器缺點
①熒光檢測器的高選擇性優點在一些情況下,也是該檢測器的缺點。因為不是所有的化合物在選擇的條件下都能發生熒光,所以熒光檢測器不屬于通用型檢測器,與紫外-可見光檢測器相比,應用范圍較窄。
②對通常發生在熒光測量中的一些干擾非常敏感,如背景熒光和猝滅效應等。雖然這些干擾在液相分析中不經常遇到,但在進行定量分析時,有必要驗證這些干擾是否存在,以及對樣品測定的影響程度。尤其對某些物質,如鹵素離子、重金屬離子、氧分子及硝基化合物等,都應予以特別注意。
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